Написать отчёт по работе: В стерильные флаконы с пробкой, вместимостью 0,5 л отбирают водопроводную воду. Исследуемую воду разводят стерильн...
Условие:
Написать отчёт по работе: В стерильные флаконы с пробкой, вместимостью 0,5 л отбирают водопроводную воду. Исследуемую воду разводят стерильной водой 1:10 и 1:100. Затем 1 мл каждого разведения стерильной пипеткой вносят в стерильные чашки Петри. В каждую чашку Петри вливают по 15 мл расплавленного и остуженного до 45°С МПА, равномерно распределяя содержимое по дну чашки Петри. Остывшие чашки переворачивают вверх дном и помещают в термостат на 24 часа при температуре 37 °С. Затем производят подсчет выросших колоний. Число выросших колоний соответствует количеству микроорганизмов в засеянном объеме воды. Считают число колоний, выросших в каждой чашке, затем умножают на соответствующее разведение. Полученное число является показателем общей микробной обсемененности воды. Водопроводная вода должна иметь микробное число, не превышающее 100 в 1 мл. Для определения титра кишечной палочки используют мембранные фильтры №3. Перед фильтрованием фильтры помещают в дистиллированную воду температуры 50-60° С и кипятят 2-3 раза по 10-15 минут с обязательной сменой воды. Обработанный фильтр помещают в воронку. Проводят фильтрацию с помощью насоса Комовского. Затем фильтр снимают стерильным пинцетом и накладывают на среду Эндо в чашке Петри. Чашки помещают в термостат на 24 часа, подсчитывают количество выросших колоний, типичных для кишечной палочки. Для идентификации выросших колоний с кишечной палочкой делают посев на глюкозо-пептонную среду (Эйкмана). При наличии характерного роста на этой среде (помутнение и газ) дают положительный ответ.
Решение:
Лабораторная работа: Определение микробной обсемененности воды и титра кишечной палочки.
Цель работы: Определить микробную обсемененность воды и титр кишечной палочки с использованием стандартных методов.
Материалы и оборудование:
- Стерильные флаконы с пробкой, вместимостью 0,5 л
- Стерильная вода
- Стерильные чашки Петри
- МПА (Мясопептонный агар)
- Термостат, установленный на 37 °С
- Стерильные пипетки
- Мембранные фильтры №3
- Дистиллированная вода
- Воронка
- Насос Комовского
- Среда Эндо
- Глюкозо-пептонная среда (Эйкмана)
Методика:
- В стерильные флаконы с пробкой, вместимостью 0,5 л, отбираем водопроводную воду.
- Разводим исследуемую воду стерильной водой в соотношении 1:10 и 1:100.
- Вносим 1 мл каждого разведения стерильной пипеткой в стерильные чашки Петри.
- В каждую чашку Петри вливаем по 15 мл расплавленного и остуженного до 45°С МПА, равномерно распределяя содержимое по дну чашки Петри.
- Остывшие чашки переворачиваем вверх дном и помещаем в термостат на 24 часа при температуре 37 °С.
- После 24 часов производим подсчет выросших колоний.
- Число выросших колоний умножаем на соответствующее разведение. Полученное число является показателем общей микробной обсемененности воды.
- Для определения титра кишечной палочки используем мембранные фильтры №3.
- Перед фильтрованием фильтры помещаем в дистиллированную воду температуры 50-60°С и кипятим 2-3 раза по 10-15 минут с обязательной сменой воды.
- Обработанный фильтр помещаем в воронку и проводим фильтрацию с помощью насоса Комовского.
- Затем снимаем фильтр стерильным пинцетом и накладываем на среду Эндо в чашке Петри.
- Чашки помещаем в термостат на 24 часа и подсчитываем количество выросших колоний, типичных для кишечной палочки.
- Для идентификации выросших колоний с кишечной палочкой делаем посев на глюкозо-пептонную среду (Эйкмана).
- При наличии характерного роста на этой среде (помутнение и газ) даем положительный ответ.
Результаты:
- Число выросших колоний в каждой чашке Петри после 24 часов инкубации является показателем общей микробной обсемененности воды.
- Количество выросших колоний, типичных для кишечной палочки, определяет титр данного микроорганизма в исследуемой воде.
Вывод:
- Полученные результаты позволяют определить микробную обсемененность воды и титр кишечной палочки.
- Водопроводная вода должна иметь микробное число, не превышающее 100 в 1 мл.